Рейтинг ленточных шлифмашин 2018: характеристики, отзывы
Ленточные шлифмашинки позволяют значительно упростить трудоёмкий процесс шлифовки по сравнению с другими типами шлифовальных машин и тем более ручной обработкой.
Действие прибора основано на вращении ленты с абразивной поверхностью и снятии верхнего слоя обрабатываемого материала, причём в случае с древесиной скорость обработки достигает 1 мм/с. За счёт линейного шлифования вдоль волокон дерева, можно добиваться отличной гладкости.
Ленточные шлифмашинки не подходят для обработки:
- пластиковых и металлических поверхностей;
- выпуклых и вогнутых участков.
На что стоит обратить внимание при выборе ленточной шлифмашинки:
- Мощность — для обработки большого объёма поверхности лучше предпочесть более производительные модели, маломощные модели будут перегреваться и имеют меньший ресурс.
- Ширина ленты — всё зависит от ширины обрабатываемых поверхностей, чем она шире, тем шире должна быть лента.
- Длина ленты — чем длиннее, тем большая поверхность обрабатывается единовременно, кроме того длинные ленты имеют больший ресурс.
- Скорость движения ленты — чем быстрее, тем ЛШМ производительнее, однако для окончательной доводки стоит производить обработку на более низких скоростях, поэтому наличие регулятора скорости — обязательный пункт при выборе.
- Вес — меньший вес даёт большую манёвренность инструменту, при этом большая мощность, практически всегда означает больший вес.
- Плавный пуск — позволяет начинать обработку без резких движений, что снизит вероятность повреждения материала.
- Стабилизатор оборотов — позволит качественно обрабатывать поверхность вне зависимости от неровностей или изъянов древесины.
- Стационарное использование — возможно крепления инструмента на столе лентой вверх для обработки кромки и мест, которые при обычном использовании обработать просто невозможно.
Далее наш рейтинг ленточных шлифмашин актуальных на 2018 год с техническими характеристиками и отзывами покупателей:
- Ленточная шлифмашина Makita 9404
- Ленточная шлифмашина BOSCH PBS 75 AE
- Ленточная шлифмашина Hammer LSM 800 B
- Ленточная шлифмашина MILITARY BS600
- Ленточная шлифмашина Hammer LSM 1000 PREMIUM
- Ленточная шлифмашина Makita 9403
- Ленточная шлифмашина Hammer LSM 810
- Ленточная шлифмашина Skil 1215 LA
- Ленточная шлифмашина Makita 9911
- Ленточная шлифмашина Makita 9910
- Ленточная шлифмашина Интерскол ЛШМ-100/1200Э
- Ленточная шлифмашина Интерскол ЛШМ-76/900
Подробнее о каждой ЛШМ:
1
Ленточная шлифмашина Makita 9404
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 1010 Вт
- Макс. скорость ленты
- Длина ленты: 610 мм
- Ширина ленты: 100 мм
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: регулировка частоты вращения, пылесборник
- Вес: 4. 7 кг
7 кгДополнительная информация
- Особенности: Автоматическая система регулировки положения ленты.
Цена
Цена от 13 380 до 18 293 (Средняя цена: 15 140 ₽)
Отзывы
Плюсы
Работает как зверь!
Минусы
Пылесборник часто засоряется.
Плюсы
Неприхотливая
Минусы
Комментарий
Лучшая средь лучших
Плюсы
Долговечность.Качествейнейшая сборка.Не греется.Мощная.
Минусы
Цена..Вес
Плюсы
Сборка Япония! Качество на высоте, приятные тактильные ощущения.
Минусы
Дороговата шлиф. лента на неё, ну и немного тяжеловата
Комментарий
Машинка на «всю жизнь» — думаю еще детям останется. Планирую сделать конструкцию для стационарного использования. Все рекомендую именно неё, если средства позволяют сейчас покупать.
Плюсы
хорошая производительность, малое количество пыли попадает мимо мешка, отсутствие проблем при работе с недорогими неоригинальными лентами
Минусы
для меня достаточно приличный вес
Плюсы
Мощная,не шумная,длинный шнур,регулировка скорости.Практически вся опилочная пыль попадает в мешок.Пылесос и не нужен.
Минусы
Без кейса.В комплекте только одна лента(пожалели).Дороговато.Шлифовать ей вертикальные плоскости конечно тяжеловато.На полах в углах у стенки мёртвая зона не прошлифовать. Графитово- пробковая подошва со временем сточится. На других не встречал данную технологию.
Комментарий
Купил для шлифовки фанеры под укладку паркета и массива.Со своей задачей справляется хорошо.Чуть зазеваешься с 40-вкой въедается.Очень доволен.Вариантов выбора среди фирм по этой мощности и ширение ленты особо нет.Не разгуляться.Только ещё Хаммер и вроде Интерскол. Остановился на Маките.
Плюсы
работаю каждый день по 8 часов в день этой машинкой, прекрасная, производительная, не убиваемая, мощная, рекомендую!
Плюсы
Мощная, удобная в работе, несмотря на немалый вес.
Японская сборка.
Минусы
Пока не обнаружено.
Комментарий
Профессиональная машина , удобная в работе.
Плюсы
Моя работа напрямую связана с использованием этой машины, уже четыре года 5 дней в неделю я шлифую ей. За этот период 4 раза менял щетки и 2 раза угольную подошву, эти операции не составляли никакого труда.
Минусы
Особенностью работы является шлифовка твердых пород дерева: ясень, дуб, граб, поэтому для моего руководителя недостатком была стоимость оригинальной ленты. Сейчас используем ленту немного уступающей по качеству оригинальной, но очень выигрывающей по цене.
Плюсы
Удобная,регулировка вращения,стабилизация положения ленты, можно использовать стационарно положив на пол.
Минусы
Плохо держится мешок для сбора пыли на патрубке, иногда соскакивает. (очень часто)
Комментарий
Вместо графитовой подошвы , которая быстро стерлась я вырезал из оцинкованной стали такой-же формы пластину и поставил ее.
2
Ленточная шлифмашина BOSCH PBS 75 AE
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 750 Вт
- Макс. скорость ленты: 350 м/мин
- Длина ленты: 533 мм
- Ширина ленты: 75 мм
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: регулировка частоты вращения, блокировка кнопки включения, пылесборник
- Дополнительная рукоятка: есть
- Вес
Дополнительная информация
- Модификация (код производителя): 0 603 2A1 120
- Комплектация: шлифовальная лента, пылесборник
Цена
Цена от 7 635 до 10 909 (Средняя цена: 8 715 ₽)
Отзывы
Плюсы
Эргономика, удобство использования, замены ленты
Минусы
Ощутимый вес, долго вертикально работать с непривычки сложно
Комментарий
Советую для покупки
Плюсы
Большая площадь шлифования, регулируемая скорость, наличие дырочек под шурупы для крепления, например, к столу вверх лентой, фильтр, хорошо центрует ленту.
Хороший фильтр (лучше, конечно, с пылесосом). Пластиковый кейс ОК.
Минусы
Тяжеловата, конечно.
Комментарий
Покупал для шлифовки паркета, отлично. Пробовал снимать старую краску (несколько слоёв) со встроенных шкафов — норм. Буду крепить к слолу вверх тормашками (есть спец. гнёзда под болты на крышке). Доволен, короче.
Комментарий
Опыта использования других шлифовальных машинок не имею, поэтому при использовании этой только радуюсь. Кто-то жалуется на переднюю ручку, мол не позволяет до конца шлифовать в некоторых случаях, но невооружённым глазом видно винтик, посредством которого она — ручка легко снимается. А вот задняя рукоятка со шнуром действительно иногда помеха.
Плюсы
Удобная смена ленты. Большая плоскость шлифовки, хорошо на больших плоскостях. Мешок для сбора пыли. Провереный бренд. Гарантия, сервис.
Минусы
В углах пола неудобно подлезать, нужна еще дельта или ручками, ручками))
Комментарий
Никогда раньше отзывов не писал, а тут допекло вот.
Собрался шлифовать полы на даче, сдуру купил на рынке плоскошлифовальную машинку нонейм. Два дня, извиняюсь за непечатное слово, помучился, поехал покупать нормальную мощную ленточную. Как говорится, хочешь сэкономить — покупай сразу хорошее! Конкретно про БОШ PBS75: ОЧЕНЬ удобный механизм смены ленты, рычажок повернул, ленту поставил, рычажок обратно, работаешь дальше. Мощность регулируется, чтобы не снять лишнее — удобно там, где нужно поаккуратнее. Пылесборник тоже практичное нововведение, вся пыль не в легких, как раньше. Хотя я все равно в респираторе предпочитаю, здоровье одно. Мораль: не занимайтесь фигней, если не одну досочку зашкурить, а большие объемы шлифования, смело берите Бошевскую ленту.
3
Ленточная шлифмашина Hammer LSM 800 B
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 800 Вт
- Макс. скорость ленты: 290 м/мин
- Длина ленты: 457 мм
- Ширина ленты: 75 мм
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: регулировка частоты вращения, блокировка кнопки включения, пылесборник
- Дополнительная рукоятка: есть
- Вес: 3. 5 кг
5 кгДополнительная информация
- Комплектация: опорная рамка, 2 струбцины, пылесборник
Цена
Цена от 4 390 до 4 399 (Средняя цена: 4 399 ₽)
Отзывы
Минусы
Порой казалось, что шумит сильно
Комментарий
Хороший инструмент по не высокой стоимости. Служит для обработки разного рода древесины, работаем им уже второй год проблем нет. При должном внимании к инструменту служит долго работает исправно. Советую.
Плюсы
Шлифовать легко и удобно. Корпус прочный и качественно собранный, лента отлично крепится, рамка хорошего качества.
Минусы
Все в полном порядке.
Комментарий
Пока менять и в мыслях нет, хотя предыдущая машинка прослужила куда меньше, практически аналогичная, а стоила дороже. Посоветовать эту вполне могу.
Плюсы
Этой машинкой пользуюсь почти год. В работе себя отлично показала. Занимаюсь изготовлением мебели и часто пользуюсь ей.
Очень удобно сделана регулировка оборотов. При финишной доводке здорово помогает. Мне понравилось, что есть мешок для сбора пыли тк работаю в замкнутом пространстве и эту пыль потом сложно удалить, да и возня с ней отнимает много времени.
Плюсы
Небольшая, лёгкая, удобная, недорого стоит. Надёжная и простая.
Комментарий
Простая и удобная ленточная шлифмашина. Хорошо сбалансирована, размер у нее не большой, поэтому не устаёшь от удерживания её. Справляется со своей задачей, мощности хватает с запасом. Надёжности тоже, поломок не было.
Плюсы
Купил ее в начале лета и до сих пор пользуюсь без всяких проблем. Шлифмашика очень удобная, что особо порадовало, что есть пылесборник. Что касается качества сборки, то тут вопросов нет, порядок полный.
Минусы
Без недостатков пока.
Плюсы
недорогая, качественная, сделана из хороших материалов и не тяжелая.
Комментарий
использовалась полгода во время стройки дома из бруса.
Работал ей каждый день и не одной поломки. Плюс — это конечно же, что есть мешок для сбора мелкой пыли и длинный толстый шнур.
Плюсы
Брал машинку для мелких работ, а оказалось, что и с серьезными справляется более чем. Пылесборник удобно расположен, корпус прочный и надежный, мощность хорошая, цена привлекательная.
Комментарий
Не ожидал, что за такую сумму возьму инструмент, который будет со мной почти год и даже альтернативу искать не собираюсь, устраивает буквально все, что у меня бывает редко при покупках нового инструмента, а машинке почти год и все отлично.
Плюсы
Инструмент толковый. Маленький в размерах и при этом достаточно мощный. Аналого за такую цену я просто не нашел.
Минусы
Недостатков не обнаружил в нем.
Комментарий
Быстро и без проблем менять ленту. Есть пылесборник, что особенно радует. Машинкой полностью доволен.
Плюсы
Работать удобно и просто, можно регулировать частоту вращения, ручка удобная, все продумано.
В комплекте пылесборник. По сборке все качественно.
Комментарий
А еще могу сказать про комплект, в комплекте шла опорная рама — вещь удобная и качественно сделанная. Инструмент вполне могу посоветовать, работаю где-то с середины лета с ним — все отлично, ни капли разочарований.
4
Ленточная шлифмашина MILITARY BS600
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 600 Вт
- Макс. скорость ленты: 250 м/мин
- Длина ленты: 457 мм
- Ширина ленты: 75 мм
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: регулировка частоты вращения, блокировка кнопки включения, пылесборник
- Дополнительная рукоятка: есть
- Вес: 3.2 кг
Дополнительная информация
- Комплектация: пылесборник, струбцины, запасные щетки
- Особенности: возможность установки в стационарном положении
Цена
Цена от 2 567 до 3 791 (Средняя цена: 3 290 ₽)
Отзывы
Плюсы
Дешёвая
Комментарий
Взял как первую шлифмашинку в своей жизни.
По акции 2100 обошлась. Обтачивать по плоскости всякие небольшие металлические детали. Поработал ей пару часов. В принципе на весу работать удобно, уперев передним концом в живот. Регулировка ленты неудобная, нужна крестовая отвертка под рукой. После прогрева начала странно хрустеть внутри, но потом очухалась, может щетки притирались. Мешок для пыли абсолютная фигня, надо подключать пылесос. Но дырка для мешка большая прямоугольная, так что придется чёт придумывать. Конструкция ведущего ролика странная — резина на половину ширины ленты, вторая половина пластмассовые рёбра. В общем пока впечатления положительные от полезности при некоторых работах, торцы выровнять, поверхность почистить.
Плюсы
Ориентировался на цену в основном, нужна была ненадолго в общем-то. Но результат выдает хороший, шлифовка качественная, управляться удобно. Ну и главное что спокойно уже год с небольшим отпахала и пока все как при покупке осталось, так что неожиданно толковый инструмент приобрел по факту.
Минусы
Все пока путем
Комментарий
Не использую машинку часто, но все же могу сказать с полной уверенностью, что моторчик надежный. На кухне со стен счищал краску, давил на машинку сильно-обороты замедлялись, но обмотка не горела. Меня устраивает, для дома самое то.
Плюсы
Удобная, надежная и совсем неприхотливая машинка. Не пришлось дорабатывать. До сих пор все в ней абсолютно устраивает. Электричества немного потребляет. Регулятор частоты вращения расположен в удобном месте и не подклинивает.
Минусы
У меня замечаний нет.
Плюсы
Оценил возможность установки ее в стационарное положение. Очень просто и устойчиво получается. Пылесборник в нужном месте сделали, помогает собрать часть пыли.
Минусы
проблем я не отметил никаких
Плюсы
Машинка хорошо. По цене обошлась недорого, по сборке все ок, качественно и со вкусом, не разваливается при больших нагрузках, не буянит, тянет все, что делаю.
Минусы
Все устраивает, недостатков нет вообще.
Плюсы
В общем и целом толковая штука — шлифует хорошо, обороты приличные. И работать самой машинкой удобно. Критичных недостатков нет, пашет надежно, так что по совокупности пятерку заработала.
Минусы
Регулировка ленты не самая удобная на мой взгляд.
Комментарий
Выход под пылесборник зачем-то некруглый, пришлось делать переходник самому. Там конечно все что нужно -кусок трубки и строительный фен, но все равно пришлось же морочится.
5
Ленточная шлифмашина Hammer LSM 1000 PREMIUM
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 1200 Вт
- Макс. скорость ленты: 500 м/мин
- Длина ленты: 610 мм
- Ширина ленты: 100 мм
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: регулировка частоты вращения, блокировка кнопки включения, пылесборник
- Дополнительная рукоятка: есть
- Вес: 6. 75 кг
75 кгДополнительная информация
- Модификация (код производителя): 118802
Цена
Цена от 6 983 до 6 999 (Средняя цена: 6 999 ₽)
Отзывы
Плюсы
металлический корпус что сейчас редкость у большинства сейчас все пластмассовое и хорошее качество сборки нет зазоров и перекосов.
Комментарий
как по мне так она безумно мощная даже с избытком. Шлифовал стол и пару скамеек. Скорость больше половины не поднимал все поверхности очень гладкие без заусенцев.
Плюсы
Снимал лак с паркета в квартире, использовал его также на даче — просто отличный вариант, да и по цене вполне приемлемо. Ничего не ломалась только ленты просто менял. Достоинства данной моделиHammer LSM 1000 PREMIUM в том, что скорость ленты регулируется и есть пылесборник.
Плюсы
Как мне кажется в этой машинке лучшее сочетание цены и качества. При покупке само собой рассматривал и других производителей, но вовсе не хотел платить больше за именитых производителей.
Именно по этому взял Хаммер. Не жалею ни капли.
Минусы
Нет. Проявляет себя только с хорошей стороны.
Плюсы
Удобно регулировать частоту вращения, пылесборник вместительный и удобно расположен, сборка качественная — ничего не разваливается, хотя уже сколько месяцев интенсивно работаю с инструментом.
Комментарий
На мой взгляд, хорошее соотношение цены и качества, лично я альтернатив не ищу, мне подходит. Ну и еще могу заметить, что хаммер дешевле многих других типа более известных производителей, хотя по моему опыту, нет смысла переплачивать за название.
Плюсы
Надежность. Низкая стоимость для такого аппарата.
Минусы
За год не пожалел, что купил именно ее.
Плюсы
Зверь-машина! Очень удобная и производительная. Очень доволен этим инструментом.
Минусы
Одно но, шнур выходит как-то совсем странно.
Комментарий
Да, инструмент хорош! Давить на него сильно нет смысла — дури в нем достаточно, для циклевки пола из сосны выше «четверки» скорость не поднимал.
Плюсы
Машинка тяжелая, почти 7 кг весит, но у нее есть металлический корпус и ее не приходится сильно прижимать к обрабатываемой поверхности. Работает не особо громко, ее предшественница была как самолет. Недостатков мной не замечено.
Комментарий
Пользуюсь уже полгода регулярно — машинка удобная и качественная. рекомендую.
Плюсы
Удобно держать и соответственно работать. Хорошие обороты, регулируются четко, так что со всеми задачами у меня справляется бодро. Ленту держит крепко, плюс прижимает за счет веса крепко.
Комментарий
По итогу придраться вообще не к чему, даже не шумит особо. То есть звук-от приличный, но все равно тише чем ожидалось.
Плюсы
Удачная модель с удобным управлением. Пользоваться одно удовольствие. пластик прорезиненный, в руках не скользит и в тоже время на набивается пылью. Скорость регулируется плавно и в зависимости от вида шлифуемого материала и частоты обработки можно выбрать аж до 500м/мин. При полировке металлических изделий эта скорость отлично подходит.
6
Ленточная шлифмашина Makita 9403
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 1200 Вт
- Макс. скорость ленты: 500 м/мин
- Длина ленты: 610 мм
- Ширина ленты: 100 мм
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: пылесборник
- Дополнительная рукоятка: есть
- Длина: 353 мм
- Вес: 5.7 кг
Дополнительная информация
- Особенности: Самая малошумная машина в своем классе (84дБ)
Цена
Цена от 12 988 до 18 879 (Средняя цена: 15 463 ₽)
Отзывы
Плюсы
Супер ДУРЬ!!! Производительная! Распространённый и дешёвый ассортимент лент.
Минусы
Цена. Не подойдет для слабых ручонок из-за веса, при работе требуется сила чтобы удержать эту дуру в руках!!!
Комментарий
Мощная, простая как три рубля, электроники нет, что на пользу профи, он и так понимает когда надо остановиться. Дури хоть отбавляй!!!
Плюсы
относительно тихая (соседи не стучат), хорошо собирает пыль, качество сборки. Макита есть Макита!
Минусы
быстрый износ графитовой подошвы
Комментарий
Являюсь поклонником этой марки. Это третий инструмент этой марки у меня, но первая шлифмашинка. Решил взять для ремонта квартиры, так как у меня везде буковый паркет. Посчитал стоимость найма работников для ремонта паркета и сравнил цену этой машинки и вышло, что она окупится после ремонта одной комнаты. Однако при шлифовке паркета выяснилось, что машинке нужно часто давать остыть из-за нагрева графитовой подошвы, которая при сильном нагреве просто отваливается ошметками. Естественно время производства ремонта вырасло. Одной ленты на 40 хватает чтобы снять до 2 квадратных метров лака (у меня всего один раз покрывали лаком при укладке паркета). Причем брал Макитовскую. Теперь решил брать менее дорогие ленты их хватает чуть меньше, но из-за цены выигрывают. Сейчас сделал всего одну комнату из трех. Купил себе наколенники, а то думал останусь без колен. Большие машинки конечно выигрывают, но их цена…Итог кому надо быстро отремонтировать паркет, то лучше нанять.
Плюсы
Мощная! Ширина ленты! не пылит! Надежная
Минусы
Цена — можно было бы чуть дешевле 🙂 нет регулировки скорости.
Комментарий
Брал на попользоваться 🙂 сильно БУ как мне показалось года 2-3. Машину ОСНОВАТЕЛЬНО юзали в известной строительной фирме, по строительству деревянных домов! А за инструментом как известно следить не любят… Пришлось самому изготавливать шину из подручных материалов листа оцинковки + старая шлифлента перевернутая на подкладку -вместо графитовой и пробковой подложки + чистить отвод пылесборника. После этого машина запела и перестала пылить! Мне нужно было шлифануть пол в доме 56 м2, справился на ура за три дня и в ненапряг, до этого шлифовал пол на первом этаже, таже площадь, отечественными шлифмашинками Зубр или калибр + Makita 9911 это был АД :-))) 7 дней елозил :-(( С Makita 9403 прошло все гораздо проще и быстрее. Причем шлифовал 80 зерном и после покрывал лаком! причем думал что нужно будет и 100 зерно покупать, но при такой мощности оказалось 80 за глаза! после вручную шкуркой снимал ворс и еще 2 слоя лака. Получилась корабельная палуба :-))) Доволен на все 100%! Всем рекомендую! Сейчас хочу продать маломощную Makita 9911 и купить новую Makita 9403 в личное пользование! отличная бюджетная альтернатива циклевочным машинам в аренду!
Плюсы
Очень удобная и шикарно шлифует. Распространенный размер ленты.
Минусы
пока не нашел
Комментарий
Очень советую. Цена -качество на5+
7
Ленточная шлифмашина Hammer LSM 810
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 810 Вт
- Макс. скорость ленты: 380 м/мин
- Длина ленты: 533 мм
- Ширина ленты: 75 мм
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: регулировка частоты вращения, блокировка кнопки включения, пылесборник
- Дополнительная рукоятка: есть
- Вес: 3 кг
Цена
Цена от 3 999 до 3 999 (Средняя цена: 3 999 ₽)
Отзывы
Плюсы
Хороший пылесборник, да и вообще сборка у машинки то, что нужно. Рукоятка удобная. Весит всего три кг для своей мощности, которая реально отличная. Работать с ней удобно и практично, ни разу не подводила.
Комментарий
Ну я со шлифмашинами всю жизнь вожусь, то столешницы обрабатываю, то еще что и могу точно сказать, что это один из лучших инструментов, которые я держал в руках.
Почему-то все негативные комментарии пишутся под скрытыми данными. У меня эта машинка два года отработала без всяких проблем. Я считаю, что в этой ценовой группе это просто идеальный вариант. Я, например, сначала хотел взять популярный брэнд, но в итоге остановился на хаммере и не прогадал. Конечно думайте сами, но я советую Хаммер.
Плюсы
Ручка расположена удобно, у ленты отличный ход, машина собрана качественно и на совесть. Обрабатываю и металл, и дерево – все отлично. Мощность хорошая, не клинит, не перегревается, все как нужно.
Комментарий
Могу смело посоветовать машинку, так как есть с чем сравнивать. Другие производители, как правило, стоят дороже, но переплачивать за название просто нет смысла.
Комментарий
Давно занимаюсь домашней столяркой – ремонты, мебель… Такой серьезный аппарат у меня впервые, раньше была древняя прибалтийская шлифмашинка. Чуть нажмешь посильнее, сразу скисала. Надоело вконец и под шлифовку детской двухэтажной кровати прикупил эту . Могу сказать, такой разницы в удобстве работы и быстроте шлифовки просто не ожидал! Смело рекомендую теперь для шлифовочных работ любого масштаба!
Плюсы
В комплекте шла шлиф лента, что вообще считаю бонусом. Размер небольшой, в руках лежит удобно, работать приятно, при этом, имеет большую мощность, отличный ход и прочный, качественно собранный корпус. Доволен тем, что выбрал эту машинку, хотя просматривал много-много аналогов, хорошо, что не переплатил.
Комментарий
Безусловно плюсами данной ЛШМ является стационарное крепление а также регулировка числа оборотов, ЦЕНА/качество, а также весьма богатая комплектация и мощность.
Плюсы
Для такого инструмента ценник очень хорош.
Минусы
Вообще никаких с ней проблем. Работает ровно без посторонних звуков.
Минусы
за более года эксплуатации недостатков не выявил!
Комментарий
Хочу поделиться впечатлениям использования шлифовальной машинки. Сделана она качественно, удобно регулируется частота вращения. Шнур электропитания достаточно длинной. Электроника работает чётко, обороты не снижаются при шлифовки. Работать одно удовольствие, вибрация не шумная.
Комментарий
Вообще, если разобраться, пара замечаний по мощности есть, при больших нагрузках максималку не выдает, но за такие деньги, я думаю, лучшего аналога не найти, так что и эту порекомендовать вполне могу.
8
Ленточная шлифмашина Skil 1215 LA
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 650 Вт
- Макс. скорость ленты: 300 м/мин
- Длина ленты: 457 мм
- Ширина ленты: 76 мм
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: блокировка кнопки включения, пылесборник
- Дополнительная рукоятка: есть
- Вес: 2.9 кг
Дополнительная информация
- Модификация (код производителя): F0151215LA
- Комплектация: фильтр, рамка, шлифовальная лента, адаптер пылесоса
Цена
Цена: 4 245 ₽
Отзывы
Плюсы
Пылеудаление, автоматика выравнивания ленты, надежность, цена
Минусы
Очень тяжело открывается контейнер пылесборника, аккуратно это сделать и не напылить под силу только иллюзионисту, лишь поэтому ставлю 4
Комментарий
Хорошая машинка за свою цену. Мощности вполне хватает, обороты не проседают, если не сидеть на ней, двигатель не перегревается при интенсивной работе по дереву в течение 6 часов. Все честно работает. Несколько раздражает, как открывается контейнер пылесборника. Не помешало бы наличие плавного пуска и регулировки оборотов, но все недостатки компенсируются стоимостью шлифмашины
Плюсы
Система пылеудаления. Ограничительная рамка в комплекте.
Минусы
Шум. Тяжелый (для работ по вертикали).
Плюсы
Плюсы
система автоматического центрирования ленты, шлифовальная рамка в комплекте
Минусы
Минусы
в качестве упаковки нужна надежная сумка, а не картонная коробка
Комментарий
В отличие от многих китайских ленточных шлифмашин, у которых лента постоянно соскакивает, приходиться постоянно ставить её на место, чем работать. У таких машин постоянно не получалось ровной поверхности. Из-за большой скорости ленты получались неровности и выбоины. Приходилось «доводить» после нее эксцентриковой шлифмашиной. Главное при покупке таких машин – чтобы лента не соскакивала. Уже более 15 лет работаю инструментами, в том числе и Skil, доверяю этой марке из-за соотношения ЦЕНЫ И КАЧЕСТВА, поэтому решил посмотреть сначала эту модель, на ней и остановился. Аппарат выглядит внушительно, лента не соскакивает из-за системы автоматического центрирования, очень быстро и легко меняется. Шлифовальная рамка в КОМПЛЕКТЕ!!! (ее нет даже у дорогих моделей конкурентов) позволяет получить ровную поверхность. Практически ВСЯ пыль попадает в пылесборник, но в помещении лучше работать, подключив пылесос. Инструментом очень доволен. Рекомендую!!! (проверено практикой)
9
Ленточная шлифмашина Makita 9911
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 650 Вт
- Макс. скорость ленты: 270 м/мин
- Длина ленты: 457 мм
- Ширина ленты: 76 мм
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: регулировка частоты вращения, пылесборник
- Размеры (Д х В): 262 x 130 мм
- Вес: 2.6 кг
Дополнительная информация
- Комплектация: шлифовальная машина, шлифовальная лента, пылесборный мешок
- Особенности: автоматическая центровка ленты, двойная защитная изоляция
Цена
Цена от 6 650 до 12 699 (Средняя цена: 8 190 ₽)
Отзывы
Плюсы
Выглядит убедительно. У друзей такая же, они ее хвалят. Я пока работала ей мало.
Минусы
Для меня тяжеловата и очень шумная. Удобно шлифовать только горизонтальные поверхности. Вертикально держать неудобно. Для этих целей лучше подойдет вибро шлифовальная на длинной ручке.
Комментарий
Машина хорошая, но оказалась не для моих целей.
Минусы
На мой взгляд, неадекватно большой кейс. Брал специально с буковкой «К» и получил такой чемоданище… в который три шлифмашинки можно уместить в ширину и полторы в высоту
Плюсы
Легкая, в руке держать очень удобно, обороты регулируются под разные покрытия, сделана аккуратно, чувствуется мощьность,одно слово макита.
Комментарий
отличная модель , всем рекомендую.
Минусы
Все-таки для обработки больших поверхностей (особенно покрытых старыми лкм или сильно загрязненных) лучше выбирать другие инструменты
Плюсы
При постоянных нагрузках не особо греется, хорошо эти нагрузки держит. К мотору нет претензий
Плюсы
Регулировка оборотов, шлифование практически без пыли — всё уходит в пылесборник.
Минусы
Не уверен, но мне кажется, если бы подошва имела небольшой ход (жесткие пружины), работа была бы комфортнее, т.к. присутствуют биения при обработке не идеально ровного пиломатериала.
Плюсы
Мощная, недорогая
Минусы
Слишком легкая для такой мощности, постоянно норовит выскочить из рук, при этом остаются вмятины и углубления в обрабатываемой поверхности, при смене шкурки постоянно нужно следить за винтом ограничения иначе протачивает свой пластиковый корпус, жутко шумит, без наушников можно поработать минут 5, не больше — гудит голова; на низкой скорости из мануала ясно, что нельзя долго работать.
Плюсы
Машинка просто не убиваемая, 2 года в столярке, только щетки сменил
Минусы
А на счет недостатков… литье корпуса просто ужасное, но немного обработки ножа + надфиль :), хотя и пофик, можно и держать за заусенки на корпусе (через перчатки не чуствуется)
Комментарий
Вообщем супер, одно рекомендую, брать с регулятором скоростей. Оно как бы и ненужно, но бывают ситуации…
Плюсы
Производительность, эргономика, вес, размер, доступность расходки
Минусы
Пока не обнаружил
10
Ленточная шлифмашина Makita 9910
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 650 Вт
- Макс. скорость ленты: 270 м/мин
- Длина ленты: 457 мм
- Ширина ленты: 76 мм
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: пылесборник
- Размеры (Д х В): 262 x 130 мм
- Вес: 2.6 кг
Дополнительная информация
- Особенности: автоматическая центровка ленты, двойная защитная изоляция
Цена
Цена от 5 844 до 8 338 (Средняя цена: 6 700 ₽)
Отзывы
Плюсы
Лёгкая, удобная, есть регулировки
Минусы
Биение ведущего ролика, быстро забивается внутро пылью, качество, на холостых за минуту начинает греться ( хотя другая попалась особо и не грелась)
Комментарий
Была у меня давно лет 10 назад такая же макита, так вот которые сейчас продают они близко не стоят. Сейчас сборка некачественная, плюс материалы сомнительного качества. На новой маките которые я смотрел на шильдике написано сделано в англии, по копьютеру пробили в магазине сборка афганистан, в документах написано китай. Вот и сами думайте какое качество. Стальная площадка в новых макитах какая то чёрная, ржавая. Когда я давно покупал была гладкая и блестящая. Решайте сами нужна она вам такая или нет да ещё и по такой цене. Можно поискать альтернативу при желании и дешевле.
Плюсы
Удобная
Комментарий
Это моя первая ш.машина,Покупал чтобы обработать веранду 42 кв м.Все хорошо кроме поломки пылесоса.
Плюсы
такая как и все шлифмашина
Минусы
сломалась после 1 месяца работы. лопнул ремень и крыльчатка сказали не гарантийный случай.
Плюсы
достаточная мощность для бытового использования, ударопрочный корпус из пластика, резиновый шнур
Минусы
не выявил
Комментарий
Хорошая шлифмашинка для обработки небольших поверхностей
Плюсы
Недорогая, качественная вещь. Легкая.
Минусы
Верю, что она оправдает все мои желания
Комментарий
Купила себе на 8 марта, собираюсь сама шкурить домик из бруса на майских
Плюсы
Относительно недорогой и мощный аппарат. Длинный резиновый кабель. Хорошо сидит в руке, не тяжелый.
Минусы
Практически нет, за исключением того, что перестал всасывать пыль в мешок, но с другой стороны главное производительность и надежность, а пылища будет стоять даже при использовании вместе с пылесосом
Комментарий
Отшлифовал целиком оцилиндрованный бревенчатый дом 6 на 9, полет нормальный. Макита как всегда на высоте. Отсутствие разных скоростей считаю непринципиальным, для более тонкой работы, нужны совсем другие машины, а на максималке быстрая шлифовка как раз то, что доктор прописал. Для своей цены отличная модель.
Комментарий
Работаю уже больше 5 лет,за это время ни одной поломки,машина эксплуатируется каждый день и беспощадно! Пробовал различные модели ленточных машин, но пока лучше этой не нашел!
11
Ленточная шлифмашина Интерскол ЛШМ-100/1200Э
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 1200 Вт
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: регулировка частоты вращения, пылесборник
- Дополнительная рукоятка: есть
- Вес: 5.6 кг
Дополнительная информация
- Комплектация: пылесборник, шлифовальная лента, запасной зубчатый ремень, 2 струбцины, коврик резиновый
Цена
Цена от 5 587 до 8 140 (Средняя цена: 6 668 ₽)
Отзывы
Плюсы
Очень удобная ручка, качественная поверхность после нее, не дорогая.
Минусы
маленький пылесборник.
Комментарий
не заменимый помощник по хозяйству, если раньше снятие краски или зачистка поверхности превращалась в нудное времяпровождение, то с машинкой всп легко и просто.
Плюсы
Высокая производительность, надежность, хорошая регулировка, стационарная установка, простая замена ленты
Минусы
Не отказался бы еще от хотя бы 2 метра шнура
Плюсы
надежный корпус из качественного пластика, длинный сетевой шнур, удобные ручки, можно использовать для заточки инструментов
Минусы
не обнаружил
Комментарий
До покупки этой машинки шлифовал в основном болгаркой с лепестковым шлифовальным кругом. Что сказать, приходилось мириться с не очень качественным результатом: на поверхности оставались разводы, запилы и прочие дефекты обработки. Да и руки уставали порядком. Ленточную шлифмашину я просто перемещаю по поверхности без особого напряга и получаю куда более лучшие результаты. Сейчас в основном использую её для циклевки паркета и зачистки металлических поверхностей от краски.
Плюсы
Конечно же, цена. А также хорошая мощность, подходит для шлифовки любых материалов, удобная в работе
Минусы
маленький пылесборник, короткий шнур
Плюсы
мощная, регулировка скорости, недорогая, струбцины в комплекте
Минусы
коротковат шнур и маленький пылесборник
Плюсы
Мощная, недорогая, отечественный производитель. Пора, пора наших поддерживать 🙂
Минусы
Хотелось бы, чтобы в комплекте был переходник для пылесоса. Хотя хороший скотч тоже решает проблему.
Комментарий
Внимательно ознакомьтесь с инструкицей, у кого рвёт ленты или кособочит. А именно, как именно производить регулировку.
Плюсы
производительность, ширина захвата
Минусы
штатный пылесборник мог бы быть побольше
Плюсы
Просто, надежно и за такую цену, что экономия идет почти в 2 раза по сравнению с аналогами. Опять же мощная машина
Минусы
Мешок пылесборника оставляет желать лучшего, да и утомляет постоянная регулировка ленты.
Комментарий
Купил и не жалею. Для тех, кто работает с инструментом впервые, настоятельно рекомендую не полениться и прочитать все правила касающиеся техники безопасности, чтобы потом в отчаянии не строчить гневные отзывы. Да и вообще, чтобы разобраться во всем. А еще лучше посоветоваться с опытными людьми.
Минусы
Пылеудаление никакое большая часть остается между лентой и корпусом и внутри натяжителя, откуда вываливается при перемещении машинки, разобрал удалил наплывы пластика стало лучше но не намного, после 3 месяцев проявилась такая штука — подкладка под опорой ленты (металлической пластины по которой движется лента) деформировалась по краям (заход и выход ленты) и теперь поверхность не плоская а слегка выгнутая в длину. Так что стоит присмотреть что-то другое. А так-же ленту приходится довольно часто регулировать (есть с чем сравнить, причем та машинка китай чистый), официльные представители утвержадают, что это плохая лента, но смена производителей мало влияет на уход ленты.
Комментарий
Больше шлифмашинки интерскола не куплю, а вот к дрелям претензий нет. По прошествии 2-х лет теперь и к дрелям интерскола имею претензии. (
Плюсы
отличная модель
Комментарий
удобная 6 скороcтей,мощная,делал лестницу,в ручную пришлось бы целый день шкурить а с ней 1 час и всё готово
12
Ленточная шлифмашина Интерскол ЛШМ-76/900
Характеристики
Общие характеристики
- Тип машины: ленточная
- Потребляемая мощность: 900 Вт
- Макс. скорость ленты: 250 м/мин
- Длина ленты: 533 мм
- Ширина ленты: 76 мм
- Питание: от сети
Функции и возможности
- Возможности: пылесборник
- Вес: 3.2 кг
Цена
Цена от 3 449 до 4 303 (Средняя цена: 4 000 ₽)
Отзывы
Плюсы
работает, не греется
Минусы
с мелкозернистой шкуркой подпрыгивает, «бьет». что именно, не разобрался.
Комментарий
подойдёт для небольших площадей
Плюсы
Если не лукавить, первая шлифовалка, так что сравнивать не с чем. Прослужила верой и правдой лет 7 точно. Мощная, но если приноровиться с выбором лент результат будет только радовать. Диапазон что она может, очень приличный и в руках спеца это очень качественный и надёжный инструмент.
Минусы
Пылеудаление слабовато.
Комментарий
Те кто не пробовали подобный инструмент будут приятно удивлены его возможностями и в столярке особенно, хотя есть и скептики ленточных машин, но их я думаю единицы. Для мелких деталей конечно крупновата, можно и ручками размяться, зато по большим плоскостям одно удовольствие и никаких усилий. Машина надёжная, мощная удобная.
Плюсы
Моща, хорошо держит ленту, удобная, стоит мало
Минусы
Кабель коротковат, как по мне
Минусы
Шумность работы
Комментарий
Машинкой доволен. Покупал когда-то давно, за 2000, домой, мне объёмы не нужны, работаю по вдохновению. Стоимость копеечная. На эти деньги отличная вещица чтоб утолить жажду творчества и размяться. Свои задачи выполняет. Неспешно, с отдыхом и остановками, как раз в моём стиле. Что в ней не совсем учли, так это шумность работы. Надо бы какой-то шумоподавитель ставить на механизм, это замечание конструкторам. Приходится беруши всовывать, люблю тишину.
Плюсы
Мощная, удобная, хорошо держит ленту, быстрая смена, простая регулировка, невысокая скорость
Минусы
Приличный вес
Плюсы
Удобная, продуманное крепление бумаги, легкая, стоимость.
Минусы
Шумит, провод короткий.
Плюсы
Мощная, работоспособная, крепкая, стоит своих денег.
Минусы
Эргономика
Комментарий
Эта мощная шлифмашинка, может выпрыгнуть из слабых рук, но зато легко зачищает любые поверхности и идеально затачивает металлические детали. Достаточно большой вес ЛШМ дает ей преимущество при работе на горизонтальной поверхности. Если поставить на нее крупный наждак, она легко удалит лак или краску, а также все неровности на большой площади. Иногда нужно регулировать центровочный ролик, чтобы с него не соскакивал наждачный лист, но это, пожалуй, единственный нюанс этой машинки.
Минусы
Тяжеловата, но учитывая мощь это простительно
Плюсы
мощность, простая замена шкурки, легко регулировать, приятная стоимость
Минусы
пылесборник так себе
комплект регулятора медицинского кислородного баллона Home Depot $ 99
Производственная среда
Партнер по сотрудничеству
Шпаргалки по огэ истории: Книга: «Шпаргалка по истории для …- комплект регулятора медицинского кислородного баллона Home Depot $ 99 ,Если информация, которую нужно взять с собой на экзамен, не помещается в бумажном варианте, шпаргалки по истории удобнее будет распечатать, или …Баллоны медицинские кислородные для дыхания по оптовой …Длина баллона не превышает 1,8 м. … содержание кислорода 99,5%. Часто задаваемые вопросы … Ведущий поставщик медицинского оборудования и комплектующих с 1999 года …
Баллоны кислородные ГОСТ 949-73 технические характеристики
НОВЫЕ кислородные баллоны с сертификатами и паспортами ГОСТ 949-73 от 2-х до 50-ти литров из углеродистой и легированной стали. Давлением 150-200 кгс/см2. Опт розница. Доставка.
Байки старого инженера
Форум создан при независимом сайте факульта ПГС МГСУ — МИСИ силами его выпускников разных лет.
Байки старого инженера
Форум создан при независимом сайте факульта ПГС МГСУ — МИСИ силами его выпускников разных лет.
Шпаргалки по огэ истории: Книга: «Шпаргалка по истории для …
Если информация, которую нужно взять с собой на экзамен, не помещается в бумажном варианте, шпаргалки по истории удобнее будет распечатать, или …
Аппарат для чистки форсунок своими руками: Прибор для …
В этот комплект входят шесть стержней, изогнутый стержень желоба, 10 уплотнительных колец и пять форсунок для регулировки давления и формы распыления.
Продажа медицинского кислородного баллона с редуктором в …
Предложения от всех поставщиков медицинского кислородного баллона с редуктором в России в наличии и под заказ на одном сайте. Выберите лучшие цены.
pkfst.ru
May 07, 2021·Новая LADA Granta Седан – Технические характеристики – Официальный сайт LADA; Кузов; Колесная формула /
Медицинские кислородные баллоны в Украине. Сравнить …
Prom.ua — Лидер онлайн-торговли в Украине. Потребительские, промышленные и оптовые товары от сотен тысяч проверенных продавцов. Все для вашего бизнеса, быта и отдыха!
Байки старого инженера
Форум создан при независимом сайте факульта ПГС МГСУ — МИСИ силами его выпускников разных лет.
Краскопульт для акриловой краски на водной основе …
Краскопульт для акриловой краски на водной основе: Краскопульт для акриловой краски …
Шпаргалки по огэ истории: Книга: «Шпаргалка по истории для …
Если информация, которую нужно взять с собой на экзамен, не помещается в бумажном варианте, шпаргалки по истории удобнее будет распечатать, или …
Ремонт шлифмашинки lsm 800 своими руками: Ремонт …
Apr 12, 2021·Чаще всего подобный комплект содержит: Щётки, предназначенные для универсальных или специальных щеточных машин. Шлифовальные чашки. Лепестковые круги. Плиты и ленточное оборудование.
кислородный баллон для домашнего использования Шри …
СП:»Шоппинг по-нашему из США+UK+DE!»(Том19)Лучшие …- кислородный баллон для домашнего использования Шри-Ланка 2017 live ,Sep 09, 2015· Для себя часто делаю покупки в интернет магазинах Америки , но доставка в Украину выходит очень …
pkfst.ru
May 07, 2021·Новая LADA Granta Седан – Технические характеристики – Официальный сайт LADA; Кузов; Колесная формула /
Аппарат для чистки форсунок своими руками: Прибор для …
В этот комплект входят шесть стержней, изогнутый стержень желоба, 10 уплотнительных колец и пять форсунок для регулировки давления и формы распыления.
Аппарат для чистки форсунок своими руками: Прибор для …
В этот комплект входят шесть стержней, изогнутый стержень желоба, 10 уплотнительных колец и пять форсунок для регулировки давления и формы распыления.
Кислородный баллон медицинский на 5л. с редуктором и …
Купить кислородный баллон медицинский на 5л. с редуктором и увлажнителем в медицинском маркете itmed (044) 299-90-99. Большой выбор! Комплектация медицинских …
Краскопульт для акриловой краски на водной основе …
Краскопульт для акриловой краски на водной основе: Краскопульт для акриловой краски …
Байки старого инженера
Форум создан при независимом сайте факульта ПГС МГСУ — МИСИ силами его выпускников разных лет.
Каталог кислородного оборудования
Каталог кислородного оборудования медицинского назначения Беларуси: купить концентратор кислорода, купить пульсоксиметр, купить СИПАП аппарат
pkfst.ru
May 07, 2021·Новая LADA Granta Седан – Технические характеристики – Официальный сайт LADA; Кузов; Колесная формула /
Влагоотделитель своими руками для компрессора видео …
Влагоотделитель своими руками для компрессора видео: Осушитель воздуха для компрессоров своими руками
Шпаргалки по огэ истории: Книга: «Шпаргалка по истории для …
Если информация, которую нужно взять с собой на экзамен, не помещается в бумажном варианте, шпаргалки по истории удобнее будет распечатать, или …
Ремонт шлифмашинки lsm 800 своими руками: Ремонт …
Apr 12, 2021·Чаще всего подобный комплект содержит: Щётки, предназначенные для универсальных или специальных щеточных машин. Шлифовальные чашки. Лепестковые круги. Плиты и ленточное оборудование.
Похожие сообщения
Случайные сообщения
замена регулятора кислородного баллона на автомобильных запчастях рядом со мной
Производственная среда
Партнер по сотрудничеству
:MAYBE.RU: Архив форума домика «Ветер Странствий», 2013-08 …- замена регулятора кислородного баллона на автомобильных запчастях рядом со мной ,Aug 14, 2013·Со мной мой компас (на шее красный шнурок). … водителям после 21. 00 запрещено пользоваться звуковыми сигналами рядом с местами, в которых подают холодные закуски и прохладительные напитки …Аккумуляторы — VOLAMARПервые шаги Гальвани Луиджи Гальвани появился на свет в Болонье 9 сентября 1737 года в семье, имеющей достаточно средств, чтобы в двадцать два года он смог закончить медицинский факультет Болонского университета.
16.03.2021 — Шины для спецтехники, шины для погрузчика …
Mar 16, 2021·Официальный поставщик индустриальных шин с собственными складами по России — Оптом и в розницу —
Волгин Владислав Васильевич. Малый автосервис …
Владислав Васильевич Волгин. Малый автосервис: Практическое пособие. Создание своего дела. Что вы
Зарядное устройство из блока питания компьютера своими …
Функции регулятора напряжения на выходе возложены на другую микросхему – tl431, которая установлена на дополнительной плате.
Печь для барбекю из кирпича своими руками фото схемы …
Печь для барбекю из кирпича своими руками фото схемы чертежи: Упс… Кажется такой страницы нет на сайте
Газогенератор, всесторонне и всеобъемлюще
На Украине сейчас «зелёный тариф» на покупку (1,14 грн за кВт-ч) сейчас выше, чем официальный тариф на продажу (0,77 грн за кВт-ч).
Книга: Морские дьяволы
Автор: Москвин Сергей, Книга: Морские дьяволы. Сергей Москвин. Морские дьяволы
гидропроблемы — narod.ru
o Похоже на смерть регулятора и (или … регуляторов жёсткости -на новые, замена рулевого -на б\у, промывка электроклапана (на помпу сил и денег уже не было). … Сначала ее выбивало со …
Аккумуляторы — VOLAMAR
Первые шаги Гальвани Луиджи Гальвани появился на свет в Болонье 9 сентября 1737 года в семье, имеющей достаточно средств, чтобы в двадцать два года он смог закончить медицинский факультет Болонского университета.
Разрушение кислородного баллона. Дмитриенко Р И — YouTube
Nov 05, 2012·Разрушение гидравлическим давлением кислородного 40-ка литрового баллона, в Институте Электросварки им. Е …
CQHAM.RU
May 01, 2008·* * * Форум CQHAM.RU Тема * * * -=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=- Тема : Вопросы построения и …
日々のいろいろ | [QMA]週末記
На данном доступном платформе пользователь моментально сможет перейти по необходимую вкладку, та что соответствует для ключевое слово: завещание, угон автомобиля, внутренние также …
Ремонт шлифмашинки lsm 800 своими руками: Ремонт …
Apr 12, 2021·Ремонт электролобзика бош (замена опорной плиты) Со временем подошва вашего лобзика может сломаться, рассмотрим как быстро её заменить своими руками и …
Зарядное устройство из блока питания компьютера своими …
Функции регулятора напряжения на выходе возложены на другую микросхему – tl431, которая установлена на дополнительной плате.
Аккумуляторы — VOLAMAR
Первые шаги Гальвани Луиджи Гальвани появился на свет в Болонье 9 сентября 1737 года в семье, имеющей достаточно средств, чтобы в двадцать два года он смог закончить медицинский факультет Болонского университета.
Вентили кислородных баллонов — Справочник химика 21
При открытом вентиле кислородного баллона и при давлении в нем более 2—3,5 МПа (20—35 кгс/см ) кислород, поступающий из баллона по трубе 5 высокого давления, давит на …
CQHAM.RU
May 01, 2008·* * * Форум CQHAM.RU Тема * * * -=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=- Тема : Вопросы построения и …
CQHAM.RU
May 01, 2008·* * * Форум CQHAM.RU Тема * * * -=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=-=- Тема : Вопросы построения и …
Датчик детонации ваз 2112 16 клапанов признаки …
Замена Как проверить Датчик детонации на ВАЗ 2110: признаки неисправности, замена своими руками
Применение кислородных баллонов — Полезно знать — Статьи
Aug 13, 2013·Объемный процент кислорода в баллоне составляет 95%. А гарантийный период обслуживания кислородного баллона составляет год. Основание кислородного баллона — цилиндр со сферическим дном.
Газогенератор, всесторонне и всеобъемлюще
На Украине сейчас «зелёный тариф» на покупку (1,14 грн за кВт-ч) сейчас выше, чем официальный тариф на продажу (0,77 грн за кВт-ч).
日々のいろいろ | [QMA]週末記
На данном доступном платформе пользователь моментально сможет перейти по необходимую вкладку, та что соответствует для ключевое слово: завещание, угон автомобиля, внутренние также …
Датчик | Трофи маркет
May 11, 2020·★ Датчик температуры охлаждающей жидкости калина Калина, диагностика и замена датчика температуры двигателя. охлаждающей lada largus Датчик температуры охл. жидкости ВАЗ 1118.1119 Калина,2170 Приора Калуга.. ..
Ремонт шлифмашинки lsm 800 своими руками: Ремонт …
Apr 12, 2021·Ремонт электролобзика бош (замена опорной плиты) Со временем подошва вашего лобзика может сломаться, рассмотрим как быстро её заменить своими руками и …
ВМЕСТО ПРЕДИСЛОВИЯ
В 1803 г., когда исполнилось 250 лет с начала русского книгопечатания и 100 лет со дня выхода первой русской газеты, историк Карамзин говорил: «История ума представляет две главные эпохи: изобретение букв и типографии».
Гидрогель внеклеточного матрикса, полученный из децеллюляризованных тканей, позволяет культивировать энтодермальные органоиды.
Сбор ткани кишечника свиньи
Использовали слизистые / подслизистые слои SI свиней (Sus scrofa domesticus) SI из породы «Пьетрен». Поросята весом до 3 кг были умерщвлены посредством тупой травмы после того, как были соблюдены критерии, изложенные ветеринарными консультантами JSR. После умерщвления животные были доставлены в лабораторию курьером, и кишечник был взят сразу по прибытии (в течение 6 часов после эвтаназии).Был собран весь SI (двенадцатиперстная кишка, тощая кишка и подвздошная кишка), и внутренняя трубка была извлечена, оставив после себя внешний слой и брыжейку. Извлеченную слизистую / подслизистую ткань затем тщательно промыли водой под давлением, открыли в продольном направлении, разрезали на части по 5 см и поместили в воду Milli-Q® (Merck Millipore) на ночь при 4 ° C на лабораторном ротаторе, чтобы начать первый этап. децеллюляризации. Каждая партия ЕСМ состояла из трех объединенных поросят SI.
Децеллюляризация ткани кишечника свиньи
DET для децеллюляризации, ранее применявшаяся для тонкой кишки крысы, была оптимизирована для кишечника свиньи 21 .После первой промывки в течение ночи ткань децеллюляризовали 4% дезоксихолатом натрия (Sigma Aldrich) в течение 4 часов при комнатной температуре (RT). После этого следовала стадия промывки в воде Milli-Q в течение 24 часов при комнатной температуре с многократной заменой воды на протяжении всего процесса, а затем стадия 2000kU ДНКазы-I (Sigma Aldrich) в 1 M NaCl (Sigma Aldrich) в течение 3 часов при комнатной температуре. . Затем ткань помещали в воду Milli-Q и промывали в течение 2 дней с многократной подменой воды. Этапы промывки имеют важное значение для удаления любых цитотоксических остатков дезоксихолата натрия.Лабораторный ротатор использовался на протяжении всего процесса децеллюляризации.
Протокол гелеобразования и включение клеток
Децеллюляризованный кишечник свиньи сушили вымораживанием в течение 72 часов (Labconco FreeZone Triad Freeze Dry Systems), измельчали до тонкого порошка с помощью мини-мельницы (Thomas Wiley, меш 40), стерилизовали гамма-облучением. (17 кГр в течение 10 ч) и хранили при -20 ° C до дальнейшего использования. Для гелеобразования порошок ЕСМ расщепляли при 4, 6, 8, 10 мг / мл в растворе пепсин / HCl (1 мг / мл в 0.1 M HCl) при комнатной температуре в течение 72 ч при постоянном вращении. Затем предварительный гель центрифугировали (200–400 g в течение 5 мин) для осаждения и удаления возможных непереваренных частиц. Кислый раствор предварительного геля обычно использовался свежеприготовленным, но его можно было хранить при 4 ° C до 1 месяца или замораживать аликвотами при -20 ° C для длительного хранения. Для посева клеток во время работы на льду и непосредственно перед использованием раствор предварительно геля уравновешивали до цитосовместимого солености, добавляя 10% 10-кратный PBS для механических тестов или 10-кратный DMEM F / 12 (Thermo Fisher) для культуры клеток и нейтрализовали до физиологического уровня. pH 7.5 добавлением 10 M NaOH и тщательным перемешиванием с модификацией опубликованных протоколов 19,20 . На этих этапах используются наконечники для пипеток с обрезанным концом, чтобы облегчить пипетирование густого геля. Гель смешивали с осадком клеток и вносили аликвоты по 30-40 мкл в чашку Петри. Гелеобразование происходило в инкубаторе за 30 мин. Органоиды культивировали в гелях ECM 4–6 мг / мл. Каждую партию кишечного порошка ЕСМ необходимо тщательно проверять на биологическую изменчивость. Потенциал переваривания, остатки дезоксихолата от промывок с плохой децеллюляризацией, способность гелеобразования и пригодность для размещения органоидной культуры должны были быть проверены для каждой новой партии, прежде чем приступить к экспериментам.
Гистология ткани
Образцы ткани были взяты случайным образом сразу после сбора урожая и после каждого цикла децеллюляризации. Для срезов, залитых парафином, образцы фиксировали в 4% растворе параформальдегида в PBS в течение 24 часов при комнатной температуре, промывали dH 2 O, обезвоживали в спирте градации, заливали и разрезали на срезы 5 мкм. Для замороженных срезов образцы мгновенно замораживали в жидком азоте, помещали в ОКТ и разрезали на срезы 7 мкм. Для геля ECM и фактора роста матрикса базальной мембраны Matrigel® со сниженным коэффициентом роста (GFR) (Corning 354230) капли фиксировали в 2% глутаровом альдегиде в течение 2 часов.После фиксации следовала еще одна промывка PBS 100–150 мкл 2% раствора агарозы до полного покрытия капли. Агарозу удаляли с каплей геля и хранили в 70% этаноле. Затем образцы агарозы / гидрогеля обезвоживали серией промывок этанолом с возрастающими концентрациями с последующими двумя промываниями ксилолом. Образцы заливали парафином и разрезали на срезы по 7 мкм. Срезы тканей окрашивали в соответствии с инструкциями производителей гематоксилином и эозином (H&E) (Thermo Fisher) и Hoechst 33342 (Thermo Fisher) для определения присутствия ядер и Picrosirius Red (PR), Elastic Van Gieson (EVG) и Alcian Blue ( AB) (Thermo Fisher) для оценки удержания коллагена, эластина и гликозаминогликанов соответственно.
Количественное определение ДНК и ЕСМ
Образцы тканей были взяты случайным образом сразу после сбора урожая и после протокола децеллюляризации для количественного определения компонентов ДНК и ЕСМ. Количественную оценку ДНК проводили с использованием мини-набора PureLink Genomic DNA Mini (Thermo Fisher). Конечную концентрацию ДНК в образцах измеряли с помощью NanoDrop (модель NanoDrop 1000 Spectrophotometer от Thermo Fisher). Компоненты ECM были количественно определены с использованием набора для анализа коллагена QuickZyme (QuickZyme Biosciences) для измерения коллагена, набора Blyscan Sulfated Glycosaminoglycan Assay kit (Biocolor) для гликозаминогликанов (GAG) и набора Fastin Elastin Assay (Biocolor) для эластина, согласно данным производителей. инструкции.
Мутность
Мутность гидрогелей оценивали с помощью спектрофотометрии ( n ≥ 5). Двести микролитров гидрогеля переносили пипеткой в 96-луночный планшет и измеряли поглощение при 450 нм при 37 ° C один раз в минуту в течение 1 часа 37 . Показания были нормализованы к контролю PBS, а затем нормализованы с использованием приведенного ниже расчета, где NA — окончательная нормализованная абсорбция, R — показание абсорбции, полученное в данный момент времени, R мин. — наименьшее зарегистрированное значение абсорбции, а R макс. — это наибольшее значение абсорбции.По временным данным, время полугелеобразования ( t 1/2), скорость гелеобразования (S) и время задержки ( t отставание) были получены с помощью логистической регрессии.
$$ {\ mathrm {NA}} = \ frac {{R — R _ {\ mathrm {min}}}} {{R _ {\ mathrm {max}} — R _ {\ mathrm {min}}}} $ $
Колебательная реология
Нейтрализованный гель (3 мл) помещали между двумя пластинами реометра, нагретого до 37 ° C, с размером зазора 1 мм и синусоидальным напряжением постоянной максимальной амплитуды 0,5 Па, приложенным при частота 1 Гц.Полученная деформация измерялась в течение ~ 1 ч 30 мин. 37 .
Колебательная реология была выполнена как исследование изменения температуры с использованием реометра Discovery HR-2 (инструменты TA). 1 мл нейтрализованного расщепленного гидрогеля выливали на предварительно нагретую стальную пластину Пельтье, 4 ° C для матригеля (100% концентрация) и для геля ЕСМ. Параллельная пластина диаметром 40 мм опускается до зазора 650–800 мкм или до тех пор, пока гель полностью не заполнит зазор. Синусоидальное напряжение постоянной 21 максимальной амплитуды 50 Па прикладывалось с частотой 25 Гц с линейным изменением температуры от 22 до 37 ° C в течение 7.5 минут, постоянная температура 37 ° C в течение 45–75 минут и, наконец, еще одно изменение температуры с 37–50 ° C на период 7,5 минут. G ’и G” измерялись за весь период.
Сканирующая электронная микроскопия (SEM)
SEM-изображения поперечного сечения, верхней и нижней поверхностей геля ECM были получены для изучения топографии поверхности материала. Все образцы фиксировали 2,5% глутаровым альдегидом (Sigma Aldrich), промывали 0,1 М фосфатным буфером (pH 7,4), затем фиксировали 1% OsO 4 (тетраоксид осмия) / 1.5% ферроцианид калия K 4 [Fe (CN) 6 ] в 0,1 М фосфатном буфере с последующей промывкой dH 2 O. Затем образцы дегидратировали в градиентной серии этанол-вода до 100% этанола (50, 60, 70, 80, 90, 95 и 100%) и сушили до критической точки с использованием CO 2 (каталожный номер 38 ). Образцы были закреплены на алюминиевых штырях с помощью липких угольных язычков, ориентированных так, чтобы представляющие интерес поверхности были представлены лучу. Образцы покрывали слоем Au / Pd толщиной 2 нм с использованием устройства для нанесения ионно-лучевого покрытия Gatan и просматривали с помощью Jeol 7401 FEG-SEM.
Анализ CAM
Оплодотворенные куриные яйца породы «Белый Леггорн» (Генри Стюарт и Ко) инкубировали в инкубаторе MultiQuip (E2) при 37 ° C и постоянной влажности 60% 39 . Утверждение этических норм было получено Комитетом по этике животных Лондонского университетского колледжа. На 3-й день развития куриного эмбриона в асептических условиях в скорлупе делали небольшое окно. Окно закрывали липкой лентой, и яйца возвращали в инкубатор до 8-го дня развития куриного эмбриона.На 8 день гели ЕСМ и трансплантаты матригеля помещали поверх САМ, яйца снова закрывали и возвращали в инкубатор. На 10 день к САМ добавляли PBS, чтобы избежать высыхания САМ. Снимки были сделаны на 13-й и 15-й день. На 15-й день трансплантаты геля ЕСМ и матригеля с окружающим САМ собирали с каждого эмбриона и фиксировали 4% параформальдегидом перед заливкой в парафин. Серийные срезы размером 5 мкм окрашивали H&E. Слайды сканировали в цифровом виде с помощью NanoZoomer (Hamamatsu Photonics K.К.).
Предварительная обработка протеомного образца
Партия лиофилизированного порошка ЕСМ, полученная из трех кишечников, была разделена на три биологических повтора, каждый обработан независимо и проанализирован в трех повторах с помощью ЖХ-МС / МС. Порошок ресуспендировали в буфере для лизиса и добавляли два дополнительных белка (каждый по 0,5 мкг / 100 мкг белкового порошка): субъединица карнитинмонооксигеназы оксигеназы (cntA, D0C9N6) из Acinetobacter baumannii и CTP-синтаза (CTPsyn, Q9VUL1) из Drosophila melanogaster.Экстракцию белка проводили путем нагревания при 90 ° C в течение 10 минут и центрифугирования с максимальной скоростью в течение 10 минут при 4 ° C. Белки, полученные из ЕСМ, восстанавливали в 0,1 М дитиотреитоле (DTT) при 95 ° C в течение 5 минут, растворяли в 8 M растворе мочевины после охлаждения до комнатной температуры, алкилировали 55 мМ йодацетамидом в течение 30 минут при 25 ° C в темноте. Алкилированные белки очищали с использованием фильтрующего устройства Microcon YM-10 (MRCPRT010, Millipore) восемь раз при 14000 × г в течение 40 минут 40 с последующим расщеплением трипсином (Promega) в течение 16 часов при 37 ° C.pH доводили до 3 добавлением муравьиной кислоты. Пептиды обессоливали на колонке C-18 и сушили до порошка, а затем ресуспендировали в 30 мкл 0,1% уксусной кислоты для следующего масс-спектрометрического анализа.
Протеомный анализ ЖХ-МС / МС
Идентификацию белков методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС / МС) проводили с использованием масс-спектрометра Thermo Fusion с жидкостной хроматографией Thermo Easy-nLC1000. 130 мин градиентов ЖХ-МС выполняли путем увеличения содержания органических веществ.Первый уровень МС был обнаружен с помощью Orbitrap с параметром разрешения при 120 K, диапазона сканирования 300–1800 m / z , допуском по массе при 10 ppm. Второй уровень MS был выделен Quadrupole, активирован HCD и обнаружен Orbitrap. Разрешение орбитальной ловушки для второго уровня МС составляло 30 К.
Протеомный биоинформатический анализ
Данные, полученные с помощью масс-спектрометрии, сравнивали с базой данных белков человека (эталонный протеом Uniprot Homo sapiens, UP000005640) с помощью MaxQuant v.1.6.7.0 (исх. 41 ). Окисление остатков метионина и ацетила белка N-терма было установлено как вариабельные модификации. Карбамидометил на цистеине был установлен как фиксированная модификация. Совпадения пептидного спектра (PSM) были скорректированы до 1%, а затем собраны до окончательного уровня ложного обнаружения на уровне белка (FDR) 1%. Абсолютное количественное определение на основе интенсивности (iBAQ) 42 было нормализовано согласно среднему количественному определению двух добавленных белков. Белки с <2 идентифицированными уникальными пептидами были отфильтрованы.Остальные 1617 белков были использованы в последующем анализе. Среднее значение и стандартная ошибка среднего среди повторов были рассчитаны в MATLAB R2017a на основе нормализованных значений интенсивности iBAQ, а затем пересчитаны в процентах. Анализ репрезентативности всех и экзосомальных белков был выполнен в DAVID 6.8 (ref. 43) . Были выбраны белки из генной онтологии — клеточный компонент (GO-CC) категорий ECM (GO-CC: 0031012) и внеклеточные экзосомы (GO-CC: 0070062). Иерархический кластерный анализ экспрессии этого набора белков ЕСМ в нативных тканях из недавнего проекта карты протеома человека 44 (онлайн-ресурс доступен по адресу http: // www.proteomicsDB.org) был получен с использованием веб-инструмента Expression heatmap 45 , сообщающего об экспрессии белков в различных тканях, количественно выраженной как iBAQ на уровне белка. Анализ главных компонентов (PCA) был выполнен в MATLAB с использованием log 10 значений интенсивности iBAQ из наших данных и из http://www.proteomicsDB.org, оба в GO-CC: 0031012.
Metabolomics
Тридцать микролитров порошка ЕСМ, расщепленного пепсином (предварительно гель), были проанализированы метаболомикой на основе газовой хроматографии-масс-спектрометрии (ГХ-МС) с использованием стандартного протокола 46 на Thermo Trace GC и масс-спектрометре DSQ II .Хроматографическая деконволюция, выравнивание и сопоставление с базой данных были выполнены с использованием MS-DIAL 3.90 (ref. 47 ).
Культура органоидов кишечника мышей
Мышей CD1 и мышей LGR5-DTR-EGFP 31 умерщвляли смещением шейки матки, и кишечник собирали от привратника до слепой кишки. Полученную ткань один раз промывали ледяным PBS, очищали от любой брыжеечной или жировой ткани и разрезали в продольном направлении. После следующей серии промываний PBS покровное стекло было использовано для сбривания ворсинок, а оставшаяся ткань была разрезана на 2–3 мм кусочки и тщательно промыта.Затем его инкубировали в 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоте (EDTA) в PBS в течение 30 минут с последующим энергичным встряхиванием в течение 5 минут в PBS. Полученный супернатант, содержащий кишечные крипты, центрифугировали при 800 об / мин в течение 5 мин при 4 ° C (Hettich zentrifugen Rotina 420). Осадок один раз промывали базальной средой (среда Advanced DMEM / F12 с добавлением по 1% каждого GlutaMAX, HEPES и пенициллина / стрептомицина) и центрифугировали при 1000 об / мин. Осадок ресуспендировали в восстановленном факторе роста Matrigel и высевали на 24-луночный планшет.Примоцин 1 × (Thermo Fisher) и ингибитор ROCK 10 мкм добавляют после выделения. Рецепт среды смотрите в дополнительной таблице 3.
Культура педиатрических кишечных и желудочных органоидов человека
Педиатрические образцы человеческого кишечника и желудка были собраны после получения информированного согласия в соответствии со всеми соответствующими этическими нормами для работы с участниками-людьми, в соответствии с руководящими принципами. лицензий 08ND13 и 18DS02. Стволовые клетки крипт SI и стволовые клетки желудочных крипт были выделены из педиатрических биопсий в соответствии с хорошо установленными протоколами диссоциации 48,49 .Изолированные крипты при первом пассаже (р0) культивировали в каплях с пониженным содержанием фактора роста матригеля или в геле ЕСМ с концентрацией 4 мг / мл. Рецепты сред см. В дополнительных таблицах 4 и 5.
Культура человеческих гепатоцитов и органоидов протоков печени
Органоиды печени культивировали в соответствии с ранее опубликованным протоколом 25,26 . Вкратце, органоиды гепатоцитов были разделены осторожной диссоциацией с помощью TrypLE Express (Thermo Fisher), в то время как органоиды протоков пассировали вручную.Органоиды высевали в гели ECM, Matrigel и экстракт базальной мембраны Cultrex® 3-D Culture Matrix ™ (BME), оба в концентрации 100%, в качестве контролей. Рецепты сред см. В дополнительных таблицах 6 и 7.
Культура органоидов SI плода человека и протоков поджелудочной железы
SI и поджелудочные железы были выделены из фрагментов ткани плода человека, полученных сразу после прерывания беременности с 10 до 20 PCW (неделя после зачатия) , в соответствии с законодательством Великобритании по биоэтике.Образцы плода были получены через совместный ресурс MRC / Wellcome Trust по биологии развития человека при информированном этическом согласии с этическим одобрением Research Tissue Bank (08 / H0712 / 34 + 5 и 08 / H0906 / 21 + 5). Аналогичный протокол изоляции для SI мыши был принят. Что касается поджелудочной железы, мезенхима, окружающая поджелудочную железу, была удалена, и эпителиальная ткань была переварена диспазой II (Gibco) в сбалансированном солевом растворе Хэнка (HBSS; Thermo Fisher) при 37 ° C в течение 3 минут. Дальнейшую диссоциацию проводили с использованием коллагеназы P (Sigma Aldrich) с осторожным пипетированием.Клеточные кластеры промывали один раз 4 мл усовершенствованной среды Игла, модифицированной Дульбекко, / питательной смеси F12 с 1% пенициллина / стрептомицина (AdDMEM / F12; + 1% P / S) и несколько раз DMEM / F12 + 1% P / S, смешивают с 30 мкл матригеля (концентрация 100%) и высевают в 24-луночные планшеты. Рецепты сред см. В дополнительных таблицах 4 и 8.
Пассаж органоидов в геле ЕСМ и матригеле
пассировали каждые 6–8 дней. Для прохождения органоидов гель ЕСМ и капли матригеля тщательно разрушают пипеткой в лунку и переносят в пробирки со льдом.Удаление ECM может быть облегчено с помощью 20-минутной обработки капель раствором для восстановления клеток (Corning) при 4 ° C. Клетки промывают 10 мл холодной базовой среды DMEM F-12 +++ (F-12 + P / S + HEPES + Glutamax) и центрифугируют при 200 × г при 4 ° C. Супернатант отбрасывают. Если остался какой-либо ЕСМ или матригель, промывка повторяется. Осадок ресуспендируют в 1 мл холодной базальной среды, и органоиды вручную разрушают узкой (обожженной) стеклянной пипеткой, предварительно смоченной 1% BSA в PBS, чтобы избежать прилипания к стеклу. Клетки промывают, осаждают и супернатант отбрасывают.Почти сухие гранулы дезагрегированных органоидов тщательно ресуспендируют либо в холодной жидкой матригеле, либо в холодном уравновешенном геле ECM, аликвотируют каплями 30-40 мкл в чашках Петри и инкубируют при 37 ° C в течение 30 минут для образования геля. Для образования одноклеточных колоний и для посева монослойных клеток гранулы органоидов обрабатывают TrypLE Express в течение 5–7 минут (в зависимости от размера и типа органоида) при 37 ° C и точном дозировании. Дезагрегированные клетки промывают, осаждают и ресуспендируют в культуральной среде с ингибитором ROCK.
Имплантация in vivo
Работа с животными была одобрена с этической точки зрения и проводилась в соответствии с лицензией на проект домашнего офиса PPL PDD3A088A. Мышей NODSCID-gamma (NSG) анестезировали смесью 2–5% изофлуран: газообразный кислород для индукции и поддержания. Органоиды поджелудочной железы заключали в гель ECM и капли Matrigel в стерильные силиконовые уплотнительные кольца (3,35 × 1,20). Посевы проводили в течение 2–4 дней перед подкожной трансплантацией мышей NSG. Для подкожной трансплантации бупренорфин 0.При индукции для обезболивания вводили 1 мг / кг. В асептических условиях делали разрез по средней линии (0,5 см) на спине мышей и вводили гель ЕСМ и капли Матригеля внутри уплотнительных колец в боковые карманы. Мышей умерщвляли через 2,5 недели, 4 недели и 8 недель после трансплантации и содержимое колец фиксировали в 4% PFA в течение 1 часа для гистологического анализа.
Количественная оценка колоний стволовых клеток и диаметров органоидов
Для количественной оценки образования колоний в гелях ECM и матригеле n ≥ 10 полей зрения при 5 × на реплику были получены на Zeiss Axio Observer A1 и подсчитаны.Для количественной оценки размеров органоидов n ≥ 50 полностью выросших органоидов случайным образом определяли количественно в различных 5-кратных полях зрения на реплику. Для лучшего приближения было измерено 3 диаметра на каждый органоид, и средний диаметр учитывался в окончательном расчете.
Анализ жизнеспособности клеток
Клетки пассировали в гель ЕСМ и матригель и засевали. Энтероиды размножали в течение 2 дней и тестировали на совместимость с комбинированным гелем. Анализ жизнеспособности проводили с использованием набора LIVE / DEAD ™ Viability / Cytotoxicity Kit для клеток млекопитающих (Thermo Fisher) в соответствии с инструкциями поставщика.Вкратце, органоиды промывали базальной DMEM F-12 и инкубировали в базовой среде с hoechst, кальцеином-AM и гомодимером этидия-1 в течение 45 минут. Клетки в геле ЕСМ и в каплях матригеля дважды промывали и анализировали. Жизнеспособность органоидов гепатоцитов анализировали с помощью анализа жизнеспособности Cell Titer-Glo (Promega) в соответствии с инструкциями производителя.
Иммунофлуоресценция и количественное определение белка
Гель ЕСМ и капли матригеля с залитыми энтероидами фиксировали 2% -ным глутаральдегидом, растворенным в PBS с Ca / Mg, в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем промывали.Для срезов капли обезвоживали 30% сахарозой в течение ночи, включали в ОКТ и разрезали на микротоме криостата на срезы 7 мкм. Окрашивание всего образца выполняли путем блокирования и повышения проницаемости клеток с помощью PBS-Triton 0,5% с BSA 1%. Первичные антитела инкубировали в блокирующем буфере в течение 24 ч при 4 ° C при вращении и тщательно промывали. Вторичные антитела инкубировали в течение ночи при 4 ° C при вращении и промывали. Список антител и разведения представлены в дополнительной таблице 9. Для количественного определения белка человеческого альбумина органоиды протоков человека и органоиды гепатоцитов плода человека культивировали в течение 3 дней (без изменения среды), и среду собирали из каждой лунки ( n = 4 на каждую лунку). состояние).Отработанные среды анализировали с помощью набора ELISA на человеческий альбумин (иммуноферментный анализ), следуя инструкциям производителя.
Получение изображения
Органоиды мышей и человека получали с помощью Zeiss Axio Observer A1. Окрашенные срезы получали на микроскопе Leica DMIL и камере DFC420C или с помощью Hamamatsu Photonics NanoZoomer. Иммунофлуоресцентные изображения окрашенных всей монтировки и срезов получали на конфокальном микроскопе Zeiss LSM 710.
Групповое 3′-секвенирование РНК
Для педиатрических органоидов SI человека РНК выделяли из культивированных органоидов в геле ECM и матригеле с 20-минутной обработкой капли раствора для восстановления клеток (Corning) при 4 ° C.Затем клетки промывали ледяным PBS для удаления остатков матрикса, которые могли помешать выделению РНК. Органоиды центрифугировали при 200 g при 4 ° C и сурнатант отбрасывали. Сухой осадок лизировали буфером RLT (Qiagen). РНК выделяли с помощью RNeasy Mini Kit (Qiagen), следуя инструкциям производителя. Суммарную РНК (100 нг) из каждого образца получали с использованием набора для подготовки библиотеки QuantSeq 3 ‘мРНК-Seq (Lexogen GmbH) в соответствии с инструкциями производителя. Амплифицированную фрагментированную кДНК размером 300 п.н. секвенировали в одностороннем режиме с использованием Nova Seq 6000 (Illumina) с длиной считывания 100 п.н.
Для органоидов протоков печени человека и органоидов гепатоцитов плода человека 5 нг РНК / образец использовали в качестве исходных данных для подготовки библиотеки в соответствии с методом CEL-Seq2 50 . Вкратце, РНК органоидов печени экстрагировали с использованием набора Qiagen RNeasy, следуя инструкциям производителя, и хранили при -80 ° C перед обработкой. Затем тотальную РНК осаждали 2 мкг GlycoBlue (Ambion) в течение ночи при -20 ° C. Гранулированные РНК растворяли в реакционной смеси для обратной транскрипции (Invitrogen) с праймерами штрих-кода UMI и dNTP (Promega) и инкубировали при 70 ° C в течение 2 минут.Был проведен синтез первой и второй цепей (Ambion), и образцы секвенирования были объединены в единую библиотеку перед транскрипцией in vitro (Ambion). Амплифицированную РНК использовали в качестве матрицы для создания библиотек комплементарной ДНК (кДНК) с использованием праймеров Illumina TruSeq. Библиотеки секвенировали на Illumina NextSeq500 с высоким выходом с использованием парного секвенирования 75 пар оснований.
Биоинформатический анализ транскриптомов
Для человеческих педиатрических органоидов SI файлы Illumina novaSeq base call (BCL) были преобразованы в файлы fastq с помощью bcl2fastq (версия v2.20.0.422) согласно руководству по программному обеспечению. Считанные последовательности были обрезаны с помощью программного обеспечения bbduk (bbmap suite 37.31), следуя руководству по программному обеспечению, для удаления последовательностей адаптеров, поли-A-хвостов и низкокачественных концевых оснований (области со средним качеством ниже 6). Выравнивание выполняли с помощью STAR 2.6.0a 51 на эталонной сборке hg38, полученной с веб-сайта cellRanger (Ensembl 93), в соответствии с интерактивным руководством по сайту. Уровни экспрессии генов определяли с помощью htseq-count 0.9.1 с использованием предварительно построенных аннотаций генов cellRanger (Ensembl Assembly 93).Все транскрипты, имеющие <1 CPM в менее чем четырех образцах и процент считываний множественных сопоставлений> 20% одновременно, были отфильтрованы. Дифференциально экспрессируемые гены (DEG) были рассчитаны с помощью edgeR 52 , используя смешанный критерий, основанный на значении p , после корректировки частоты ложных открытий (FDR) методом Бенджамини-Хохберга, ниже 0,05 и абсолютного логарифма 2 ( кратное изменение) выше 1. Анализ главных компонентов был выполнен с помощью разложения по сингулярным значениям (SVD) на данных журнала 2 (CPM + 1) после центрирования с использованием MATLAB R2019a (The MathWorks).Иерархическая кластеризация наборов генов, связанных с ECM 28 , была выполнена с евклидовым расстоянием и полным сцеплением с использованием данных, центрированных по медиане, и нанесена на тепловые карты с использованием MATLAB. Анализ избыточного представления DEG категорий генной онтологии (GO) был выполнен с использованием ClueGO (версия 2.5.4) 53 .
Для органоидов протоков печени человека и органоидов эмбриональных гепатоцитов человека было выполнено секвенирование библиотеки ДНК, сопоставление с эталонным геномом человека и количественная оценка количества транскриптов 50 .Вкратце, библиотеки массового секвенирования органоидов печени были проанализированы с использованием пакета DESeq2 54 . Биоинформатический анализ проводился с использованием R версии 3.4.0 (R Foundation, https://www.r-project.org) и RStudio версии 1.0.143 (https://www.rstudio.com).
ПЦР в реальном времени
кДНК получали с использованием набора для обратной транскрипции кДНК высокой емкости (Applied Biosystems, # 4368813). Количественное определение ПЦР выполняли с использованием PowerUp ™ SYBR® Green Master Mix (Applied Biosystems, A25742).Анализы для каждого образца проводились в трех экземплярах и были нормализованы до β-актина гена домашнего хозяйства, где данные были выражены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Последовательности праймеров перечислены ниже: